液相色譜柱在液相色譜儀的使用中是*的材料,好的色譜柱才能測定出準確的數據。本文帶你了解哪些參數能夠體現液相色譜柱的價(jià)值。
硅膠基質(zhì)
純度高本錢(qián)低,強度大,化學(xué)修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩定,但經(jīng)過(guò)特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。
孔容和機械強度
孔容,又稱(chēng)“孔體積”。指單位顆粒的空隙體積大小。它能很好的反應填料的機械強度??左w積大的填料相對孔體積小的填料機械強度要略弱??左w積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離,而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜。
孔徑和比表面積
HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,盡大多數的反應表面于孔內。因此,分子應進(jìn)進(jìn)孔內才能被吸附和分離??讖胶捅缺砻娣e是相輔相成的兩個(gè)概念??讖叫”缺砻娣e大,反之亦然。比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和復雜成分的分離度,比表面積小,平衡時(shí)間快,適合梯度分析。
液相色譜柱的含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現不同的選擇性,用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在0.07-0.19不等。
顆粒外形
大多現代HPLC填料都是球形顆粒,但有時(shí)是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長(cháng)的柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí),不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價(jià)格。
顆粒粒徑
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時(shí)會(huì )導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,可以使用1.5μm的填料,另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
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